Mikki Hiiren ensi-esiintyminen valkokankaalla tapahtui marraskuussa 1928 lyhytelokuvassa Steamboat Willie (Höyrylaiva Ville). Siitä tuli suuri menestys, ja Mikin ura piirroselokuvan tähtenä oli selvä.
Suuri suosio johti hyvin nopeasti siihen, että Mikki Hiiri ensimmäisenä piirroshahmona sai omat oheistuotteensa. Ensimmäinen kirja julkaistiin vuonna 1930, ja samana vuonna saavuttivat sanomalehdissä ilmestyvät sarjakuvat miljoonan lukijan rajan. Ingersoll teki ensimmäisen Mikki-rannekellon vuonna 1933, ja se merkitsi Mikin astumista myös oheistuotteiden puolelle: leluihin sekä vaate-, koru-, peli- ja taloustavaratuotteisiin.
Vuonna 1932 Walt Disneylle myönnettiin kunnianosoituksena Oscar-palkinto Mikki Hiiren luomisesta. Mikin ensiesiintyminen pitkässä piirroselokuvassa tapahtui vuonna 1940, jolloin hän esitti pääroolia Fantasia-elokuvan osana olleessa Noidan oppipoika -tarinassa. Elokuvassa Pennitön ja suruton näemme Mikin kertomuksessa Mikki ja pavunvarsi, joka julkaistaan ensi kertaa Suomessa tammikuussa 2004.
Mikki Hiiri on ollut koko Walt Disney Companyn symboli jo yli 60 vuotta. Waltilla itsellällään oli Mikille erityinen paikka sydämessään. Yksi hänen kuuluisimmista lausahduksistaan koskeekin Mikkiä: - Toivon, ettemme koskaan unohda yhtä asiaa - että kaikki alkoi hiirestä.
Näin Mikki syntyi
Syynä Mikki Hiiren syntymään on se, että Walt Disney menetti oikeudet piirtämäänsä Oswald, The Lucky Rabbit hahmoon. Hän korjasi vahingon luomalla hauskemman ja elävämmän hahmon, Mikki Hiiren, ja piti tällä kertaa huolta siitä, että kaikki tekijänoikeudet menevät oikein.
Ennen esiintymistään elokuvassa Steamboat Willie nähtiin Mikki Hiiri mykkäelokuvissa Plane Crazy (Lentokonehullu) ja The Gallopin' Gaucho (Laukkaava Gaucho). Walt Disney ei kuitenkaan saanut näitä myydyksi, sillä äänielokuva oli tehnyt läpimurtonsa vuosi sitten elokuvalla The Jazz Singer ja elokuvayleisö menetti kiinnostuksensa mykkäelokuviin. Molemmat piirretyt varustettiin ääniraidalla ja esitettiin myöhemmin.
Vuosina 1920-1930 luotiin kaiken kaikkiaan 102 elokuvaa alkuperäisestä 120:sta Mikki Hiiri lyhytelokuvasta. Suurin osa elokuvista oli mustavalkoisia. Mikki Hiiren ensimmäinen värielokuva oli The Band Concert vuodelta 1935.